Protocolo para avaliaÃÃo da expressÃo gene ABL sob estresse radioativo

AUTOR(ES)

FÃrida Coeli Barros Correia Melo

DATA DE PUBLICAÇÃO

2008

RESUMO

As crescentes aplicaÃÃes das radiaÃÃes ionizantes, associadas à evoluÃÃo das tÃcnicas de anÃlises moleculares, tÃm despertado grande interesse para identificaÃÃo de marcadores moleculares de irradiaÃÃo ocupacional ou acidental. Alguns genes envolvidos na resposta molecular ao estresse radioativo foram identificados pela alteraÃÃo de sua capacidade de expressÃo. Entretanto, os mÃtodos comumente utilizados para avaliaÃÃo da expressÃo gÃnica sÃo laboriosos e de alto custo. Neste trabalho, o gene ABL foi utilizado como base no estabelecimento de um protocolo para avaliaÃÃo da expressÃo gÃnica em linfÃcitos, apÃs irradiaÃÃo gama. Para tanto, foram testadas amostras de sangue perifÃrico de indivÃduos sadios apÃs 3, 6 e 12 horas de irradiaÃÃo com doses de 1 e 3 Gy a partir de uma fonte de Cobalto-60. A tÃcnica de avaliaÃÃo empregada foi a de ReaÃÃo em Cadeia da Polimerase em Tempo Real, tendo o fluorÃforo Sybr green como intercalante de DNA. Em todas as etapas, amostras nÃo irradiadas foram empregadas como controle. O RNA foi extraÃdo dos linfÃcitos totais e o cDNA, sintetizado pelo mÃtodo de transcriÃÃo reversa. Com base no protocolo desenvolvido, foi possÃvel identificar um aumento na expressÃo do gene ABL na dose de 1 Gy, apÃs seis horas. Entretanto, nÃo foram evidenciadas variaÃÃes estatisticamente significantes dos nÃveis de expressÃo desse gene nas demais condiÃÃes analisadas. O protocolo estabelecido nessa pesquisa mostrou-se de fÃcil reproduÃÃo e rÃpido. Os recursos empregados para avaliaÃÃo de sua eficÃcia constataram a confiabilidade do mÃtodo, sugerindo sua aplicaÃÃo em anÃlises tanto dos nÃveis de expressÃo do gene ABL, quanto em investigaÃÃes de genes candidatos a biomarcadores moleculares de exposiÃÃo à radiaÃÃo ionizante

ASSUNTO(S)

ionizing radiation abl gene biomarcador biomarker engenharia nuclear pcr em tempo real real time pcr radiaÃÃo ionizante gene abl

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