AvaliaÃÃo do uso de cÃlulas da levedura Pichia pastoris para expressÃo do gene L1 do PapilomavÃrus Humano tipo 16

AUTOR(ES)

Eliane Campos Coimbra

DATA DE PUBLICAÇÃO

2007

RESUMO

Os papilomavÃrus humanos infectam o tecido epitelial mucoso ou cutÃneo provocando o aparecimento de verrugas ou papilomas benignos que podem regredir ou evoluir para lesÃes malignas. A infecÃÃo por HPV à a doenÃa sexualmente transmissÃvel mais freqÃente do mundo e està relacionada com a etiologia de certos tipos de cÃnceres, principalmente os anogenitais. O cÃncer cervical à o segundo mais freqÃente entre as mulheres do mundo e o HPV-16 à o tipo mais encontrado, presente em 60% dos casos. Estudos para o combate da infecÃÃo mostram que as vacinas baseadas em Virus-Like Particles (VLPs), formadas a partir das proteÃnas capsidiais L1/L2 ou L1, induzem à produÃÃo de anticorpos neutralizantes que conferem proteÃÃo contra o mesmo tipo viral. A imunidade humoral à direcionada contra os epÃtopos conformacionais da proteÃna L1 que compÃe 90% da estrutura capsidial. As VLPs sÃo obtidas atravÃs da expressÃo dos genes capsidiais em sistema de expressÃo heterÃlogo e processos de purificaÃÃo. A levedura Pichia pastoris à um sistema de expressÃo, eficiente e de baixo custo para a produÃÃo de altos nÃveis de proteÃnas, alÃm de apresentar vantagens em relaÃÃo a outros sistemas. Neste trabalho foi proposta a expressÃo do gene L1 de HPV-16 em cÃlulas da levedura P. pastoris, como base de uma estratÃgia vacinal para o controle do cÃncer de colo de Ãtero. O gene L1 de HPV-16 foi clonado em vetor de expressÃo pPICZA e a construÃÃo pPICZL1H16 foi integrada no genoma de Pichia. A transcriÃÃo do gene L1 foi confirmada por meio de RT-PCR e a expressÃo da proteÃna, por imunodetecÃÃo em Dot Blot. A obtenÃÃo dos clones de P.pastoris que expressam a proteÃna L1 de HPV-16, permitirà o desenvolvimento de mais uma estratÃgia vacinal baseada em VLPs

ASSUNTO(S)

vlps pichia pastoris sistema de expressÃo heterÃloga hpv papilomavÃrus humano genetica

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