ExpressÃo do gene L1 do PapilomavÃrus bovino tipo 4 em cÃlulas da levedura Pichia pastoris

AUTOR(ES)

Helder Melo de Souza

DATA DE PUBLICAÇÃO

2007

RESUMO

Os papilomavÃrus constituem um grupo de pequenos vÃrus de DNA de dupla fita caracterizados por induzirem a formaÃÃo de lesÃes que sÃo em geral benignas, podendo regredir naturalmente ou se transformar em tumores malignos. Dentre eles se encontra o papilomavÃrus bovino (BPV). Atà o momento sÃo bem caracterizados seis diferentes tipos de BPV (BPV de 1-6) e recentemente outros dois novos tipos (BPVs 7 e 8) foram descritos. Na regiÃo Nordeste do Brasil, em especial no Estado de Pernambuco (regiÃo da Zona da Mata), a incidÃncia de papilomatose bovina à muito alta provocando grandes perdas econÃmicas para os criadores. No momento nÃo hà tratamento com eficÃcia comprovada. A proteÃÃo contra infecÃÃo à conferida por anticorpos neutralizantes direcionados proteÃna estrutural L1. Estes anticorpos podem ser eficientemente induzidos por imunizaÃÃo com virus-like particles (VLP), que se formam espontaneamente apÃs a expressÃo de L1 em vetores recombinantes. A levedura metilotrÃfica Pichia pastoris emergiu como um sistema heterÃlogo, eficiente e de baixo custo para a produÃÃo de proteÃnas. Neste trabalho foi avaliada a produÃÃo da proteÃna L1 de BPV-4 por cÃlulas de P. pastoris. O gene L1 foi amplificado e clonado no vetor de expressÃo pPICZA (Invitrogen). As cÃlulas de P. pastoris foram transformadas com pPICZAL1B4. Os transformantes de P. pastoris obtidos foram analisados para expressÃo do gene L1 por RT-PCR e Dot blot. Os transformantes analisados mostraram transcriÃÃo do gene L1 e conseqÃente produÃÃo da proteÃna

ASSUNTO(S)

virus-like particles pichia pastoris expressÃo heterÃloga genetica papilomavÃrus bovino proteÃna l1

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