Stenocarpella maydis and Stenocarpella macrospora Sutton variability, damage and detection in corn seed / Variabilidade, danos e detecÃÃo de Stenocarpella maydis e Stenocarpella macrospora em sementes de milho

AUTOR(ES)
DATA DE PUBLICAÇÃO

2006

RESUMO

A podridÃo do colmo e a podridÃo espigas do milho (Zea mays L.) causadas pelos fungos Stenocarpella macrospora (Earle) Sutton [Sin. Diplodia macrospora Earle in Bull.] e Stenocarpella maydis (Berk.) Sutton [Sin. Diplodia maydis (Berk.) Sacc.; D. Zeae (Schw.) Lev.] sÃo de ocorrÃncia ampla, abrangendo toda a regiÃo de plantio dessa cultura, principalmente nas regiÃes quentes e Ãmidas. Esses fitopatÃgenos afetam a germinaÃÃo das sementes, causam colapso prematuramente das plantas infectadas na fase reprodutiva e paralisam o processo normal de enchimento de grÃos, com conseqÃÃnte queda da produtividade. A presenÃa desses fungos nos grÃos de milho reduz a qualidade nutricional das raÃÃes, alÃm de poduzirem micotoxinas. Normalmente sÃo necessÃrios quatorze dias para detecÃÃo desses fungos, nos testes de sanidade com incubaÃÃo direta da semente de milho. Neste sentido, os objetivos desta pesquisa foram: avaliar, em maiores detalhes, as relaÃÃes do complexo Stenocarpella em associaÃÃo com as sementes de milho; caracterizar por meio de tÃcnicas moleculares os fungos S. macrospora e S. maydis e verificar a possibilidade do uso de marcadores moleculares e proteÃmicos como parte de testes diagnÃsticos destes fungos em sementes. Observou-se o efeito de cinco isolados de S. mcrospora sobre os hÃbridos de milho DKB-212 e DKB-333-B e o efeito dos cinco isolados de S. maydis sobre os hÃbridos de milho DKB-214 e DKB-333-B, inoculados em sementes. Observou-se que todos os isolados de S. macrospora aumentaram o Ãndice de severdiade de doenÃa (ISD) e afetaram a germinaÃÃo, a emergÃncia de plÃntulas, o Ãndice de velocidade de emergÃncia (IVE), a sobrevivÃncia de plÃntulas e o peso de matÃria seca da parte aÃrea (PMSA) e de raiz (PMSR). Todos os isolados de S. maydis, exceto um (May-43), proporcionaram o aumento do ISD das sementes dos hÃbridos DKB-214 e DKB-333-B inoculados, e afetaram negativamente a germinaÃÃo, a sobrevivÃncia de plÃntulas, o PMSA e o PMSR do hÃbrido DKB-333-B. Para as sementes do hÃbrido DKB-214, apenas dois isolados (May-57 e May-74) afetaram negativamente essas variÃveis. A caracterizaÃÃo morfolÃgica dos isolados de S. macrospora e de S. maydis foi determinada atravÃs do crescimento miceliano, o nÃmero de picnÃdios/cm2 em meio BDA, OA, EMA, CZA (meio Czapek), em dois regimes de temperatura, a 20oC e a 25oC. A caracterizaÃÃo molecular dos isolados de S. macrospora e de S. maydis foi realizada por meio do seqÃenciamento dos produtos de PCR obtidos com oligonucleotÃdios desenhados para a regiÃo ITS do rDNA e para o gene da β-tubulina. Ambos os mÃtodos foram eficientes na diferenciaÃÃo dos isolados de S. macrospora e de S. maydis. Entretanto, nÃo foi possÃvel distinguir, com consistÃncia, a origem geogrÃfica dos isolados, a partir das anÃlises de caracterizaÃÃo morfolÃgica e molecular dos isolados de S. macrospora e S. maydis. Os produtos da digestÃo trÃptica do extrato de proteÃna total obtidos de culturas puras de Drechslera maydis, S. maydis, S. macrospora, F. verticillioides e de sementes de milho inoculadas com S. maydis e S. macrospora, pela tÃcnica de restriÃÃo hÃdrica (RH) por 72 horas foram analisadas por RP-HPLC. A anÃlise em espectrÃmetro de massa Q-TOF foi realizada com os produtos da digestÃo trÃptica do extrato protÃico total de sementes de milho nÃo inoculadas, das sementes inoculadas com S. maydis e com S. macrospora, pela tÃcnica de restriÃÃo hÃdrica e o extrato miceliano de culturas puras de S. maydis, S. macrospora e F. verticillioides. Os dados obtidos por RP-HPLC revelaram diferenÃas nos perfis cromatogrÃficos de culturas puras de ambos fungos, no tempo de retenÃÃo de 25 minutos. Entretanto, diferenÃas marcantes nos perfis cromatogrÃficos obtidos de sementes inoculadas com os dois fitopatÃgenos, nÃo foram identificadas por essa tÃcnica. A anÃlise discriminante realizada com base nos espectros MS, dos intervalos de 20 a 30 minutos e 50 a 60 minutos, obtidos das diferentes amostras estudadas revelaram que os fungos S. maydis e S. macrospora podem ser detectados diferencialmente em sementes de milho e tambÃm possibilitaram a distinÃÃo das diferentes espÃcies fÃngicas analisadas. Desta forma, os dados obtidos neste trabalho, indicam que existe grande potencial de utilizaÃÃo da espectrometria de massa no desenvolvimento de novos mÃtodos de detecÃÃo de fitopatÃgenos em sementes.

ASSUNTO(S)

its mÃtodo de inoculaÃÃo de sementes mass espectrometry priming maize fungo cromatografia espectrometria de massa marcador molecular priming molecular marker fitopatologia seed inoculation method β detecÃÃo. β -tubulina fungi cromatography diagnose milho -tubulin diagnose regiÃo its detection

ACESSO AO ARTIGO

Documentos Relacionados