Isolamento, caracterizaÃÃo parcial e imobilizaÃÃo em sepharose cl-4b da lectina de entrecasca de Crataeva tapia l

AUTOR(ES)
DATA DE PUBLICAÇÃO

2004

RESUMO

Lectinas sÃo proteÃnas ou glicoproteÃnas de origem nÃo imune cuja ligaÃÃo reversÃvel e especÃfica a carboidratos resulta em aglutinaÃÃo celular. Estas proteÃnas, presentes em plantas, bactÃrias, invertebrados ou vertebrados, sÃo detectadas por ensaio de hemaglutinaÃÃo. Crataeva tapia L. pertence à famÃlia Capparaceae. Uma lectina de entrecasca de C. tapia, CrataBL, foi purificada à homogeneidade atravÃs de fracionamento com sulfato de amÃnio (FraÃÃo 30- 60%), seguida por cromatografia de afinidade (gel de guar) ou troca iÃnica (CMCelulose). CrataBL foi ativa com eritrÃcitos de humanos, galinha e coelho (atividade hemaglutinante especÃfica, AHE, 102) e principalmente inibida por glicoproteÃnas. CrataBL foi termoestÃvel e tratamento com EDTA nÃo afetou a atividade hemaglutinante (AH); atividade nÃo foi alterada apÃs adiÃÃo de Ca2+, Mn2+, Mg2+. CrataBL migrou como uma Ãnica banda apÃs eletroforese para proteÃnas nativas bÃsicas e duas bandas polipeptÃdicas de massa molecular 21 e 40.000 Da apÃs SDS-PAGE com ou sem agente redutor; os polipeptÃdeos foram tambÃm detectados sob o gel usando reagente para glicoproteÃna. A natureza glicoprotÃica de CrataBL foi tambÃm revelada por sua interaÃÃo com lectina glicose/manose sob gel de agarose. A massa molecular da lectina por cromatografia de gel filtraÃÃo foi de 52.000 Da. CrataBL imobilizada em Sepharose CL-4B adsorveu bioseletivamente e purificou caseÃna, fetuÃna e ovoalbumina

ASSUNTO(S)

bioquimica lectinas crataeva tapia isolamento

ACESSO AO ARTIGO

Documentos Relacionados