Escherichia coli isolated from drinking water: fenotypic and genotypic characterization of virulence factors / Escherichia coli isoladas de agua de consumo : caracterização fenotipica e genotipica das propriedades de virulencia

AUTOR(ES)
DATA DE PUBLICAÇÃO

2006

RESUMO

Estudos de infecções causadas pela ingestão de águas contaminadas, em especial por Escherichia coli, são importantes para definir o papel dessas bactérias em casos de gastroenterites. Devido à ocorrência freqüente da diarréia infantil na cidade de Ouro Preto-MG, análises microbiológicas da sua água de consumo determinaram a presença de E. coli. No presente trabalho, propriedades fenotípicas e genotípicas de virulência foram estudadas em 97 amostras de E. coli isoladas da água de consumo desse município. Os resultados obtidos para padrões de adesão mostraram que 79 (81,4%) amostras aderiram a células HEp-2 em diferentes padrões de adesão, sendo que 49 (62%) amostras aderiram de forma agregativa, 16 (20,3%) apresentaram o padrão difuso, 12 (15,2%) aderiram de forma não característica e 2 (2,5%) apresentaram o perfil de adesão localizada ?like?. Por ensaios de hemaglutinação verificou-se que 70 (72%) amostras hemaglutinaram hemácias de cobaia, 64 (65,9%) aglutinaram hemácias eqüinas, 5 (5,2%) foram positivas com hemácias humanas do grupo A e 10 (10,3%) aglutinaram hemácias bovinas. Todas essas amostras evidenciaram um perfil de hemaglutinação manose sensível, o que está associado à presença da fímbria tipo 1. Outro fator de virulência detectado foi a produção de aerobactina em 11 (11,3%) isolados. Em relação à expressão de hemolisinas em meio sólido, 50 amostras de E. coli foram positivas em placas de ágar sangue contendo hemácias de cavalo, 37 lisaram hemácias de carneiro, 28 lisaram eritrócitos de cobaia, nove lisaram eritrócitos humanos e seis foram positivas com hemácias bovinas. Entretanto, os sobrenadantes de cultura de todas essas bactérias não apresentaram atividade hemolítica ?in vitro?. Em relação à atividade citotóxica dos sobrenadantes de cultura das amostras, verificou-se que 89 deles provocaram diferentes alterações morfológicas em células Vero, HeLa e CHO. Deste total, 39 apresentaram efeito citotóxico caracterísitico de desarranjo do citoesqueleto celular, foram estáveis ao aquecimento por 100ºC e demonstraram atividade enterotóxica em camundongos recém nascidos. Estudos genotípicos pela PCR, identificaram nove amostras eltIA+, uma amostra stI+, 14 stII+, seis _ hLy+, três sat+, três astA+, duas pic+, 10 kps+, 11 iucD+, 88 fimH+, seis eae+, três papC+ e uma papG1+. Nenhuma amostra foi positiva para os genes stx1, stx2, stx2v, eltIIA, cnfs, cdt, enhly, pet, bfp, inv, K88 e 987p, aggA, aafA e papGII/GIII. Baseado na aderência em células, na produção de toxinas e na presença de genes de virulência, classificou-se 24 amostras como ETEC, 6 como EPEC atípicas , 36 EAEC e 13 como DAEC. Nenhuma amostra foi classificada como EHEC e EIEC. Estes resultados sugerem um possível envolvimento destas amostras de E. coli como um dos agentes enteropatogênicos envolvidos nas infecções entéricas ocorridas na cidade de Ouro Preto

ASSUNTO(S)

virulence factors diarrhea in children escherichia coli diarreia em crianças enterotoxinas enterotoxins fatores de virulencia agua potavel drinking water

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