CARACTERIZAÇÃO DAS AMOSTRAS CLÍNICAS DE Cryptococcus neoformans ISOLADOS EM SERGIPE NO PERÍODO DE 2001 A 2004

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DATA DE PUBLICAÇÃO

2005

RESUMO

Cryptococcus neoformans é um fungo oportunista que desencadeia meningite tanto em pacientes imunocompetentes como em pacientes hígidos Este trabalho teve como objetivo estudar as variedades (neoformans e gattii) de Cryptococcus neoformans isolados no Estado de Sergipe a partir do LCR de pacientes com meningite infecciosa. Também teve como objetivo determinar a sensibilidade de C. neoformans variedade neoformans e variedade gattii, isolados do líquor de pacientes com meningite infecciosa no Estado de Sergipe, através do método de microdiluição (NCCLS) e determinar o mating type de isolados clínicos de Cryptococcus neoformans através da Reação em Cadeia da DNA Polimerase em Sergipe. Foram utilizadas amostras do LCR que deram entrada no IPH/LACEN/SE no período de 2001 a 2004. Foi realizada microscopia direta através da coloração com Tinta Nanquim. Uma alíquota do líquor foi transferida para tubos contendo Agar Sabouraud com clorafenicol e incubado em temperatura ambiente 25C e a 37C.Foram realizadas provas para identificação presuntiva, fenotípica em meio Níger e das variedades em meio CGB. No período analisado, apenas uma amostra apresentou características fenotípicas em meio Níger diferenciada das outras. Do total de 15 amostras analisadas em meio CGB, 02 amostras (13,33%) se apresentaram positiva, ou seja, foram identificadas como variedade gattii, sendo uma delas isolada de paciente soronegativo para HIV (paciente não aidético). As outras 13 amostras (86,67%) apresentaram CGB negativo, ou seja, foram identificadas como variedade neoformans. A maioria das amostras de Cryptococcus neoformans isolados do líquor de pacientes com meningite infecciosa são da variedade neoformans em Sergipe. Para a realização do teste de sensibilidade foram utilizadas duas amostras de C. neoformans variedade gattii e 11 de C. neoformans variedade neoformans listadas acima. Para controle dos testes foi utilizada a cepa padrão ATCC 32608. Em seguida foi realizada a preparação do inóculo. Foram utilizados os seguintes antifúngicos: Anfotericina B, Fluconazol, Cetoconazol, Miconazol, Itraconazol, 5- Fluorocitosina e Terbinafrina. A suspensão fúngica foi ajustada numa concentração final de 0,5x10 para 2,5x10 UFC no meio RPMI. O experimento foi realizado em placas de microtitulação. Após a inoculação, as placas de microdiluição foram incubadas a 37C e lida em 24, 48 e 72 horas. O ponto final da CIM foi determinado nas leituras de 48 e 72 horas. Os isolados clínicos de C. neoformans apresentaram valores altos de CIM para os agentes antifúngicos testados, o que simboliza uma alta taxa de resistência principalmente a Anfotericina B e ao Fluconazol, dado que pode ser correlacionado com os dados clínicos. Para análise do mating type sexual foram utilizadas 13 amostras de C. neoformans a partir do líquor de pacientes com meningite infecciosa em Sergipe durante o período de 2001 e 2004. Os procedimentos laboratoriais relacionados à biologia molecular seguiram como referência Chatuverdi et al. (2000). Todas as amostras de C. neoformans tanto aquelas pertencentes à variedade neoformans como gattii são matting type a, considerado de maior virulência.

ASSUNTO(S)

cryptococcus gattii tipo sexual cryptococcus neoformans varieties health publishes cryptococcus neoformans variedades saúde publica cryptococcus gattii sexual type teste de sensibilidade epidemiologia medicina sensitivity test epidemiology

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