Utilização de métodos de análise no fracionamento de biomoléculas potencialmente imunossupressoras do fungo ambiental Trichoderma stromaticum

AUTOR(ES)
FONTE

IBICT - Instituto Brasileiro de Informação em Ciência e Tecnologia

DATA DE PUBLICAÇÃO

23/08/2011

RESUMO

O Trichoderma stromaticum é utilizado como agente de biocontrole do patógeno Moniliophora perniciosa, causador da doença vassoura-de-bruxa do cacaueiro. Os dados coletados mostraram que os esporos de T. stromaticum inibem mecanismos de defesa da imunidade inata de camundongos. Isto sugere que os esporos possuem substâncias biologicamente ativas com efeitos imunossupressores. O objetivo desta pesquisa foi fracionar possíveis moléculas do fungo T. stromaticum que apresentam potencial imunossupressor na funcionalidade de fagócitos. Esporos do T. stromaticum cultivados em meio BDA (batata dextrose agar) foram extraídos da placa de cultura e aquecidos a 100 °C por 15 minutos (esporos inativos) ou não (esporos ativos) para posterior processamento e avaliação da ultraestrutura por Microscopia Eletrônica de Transmissão (MET). Os esporos ativos foram utilizados para a produção do extrato bruto de Trichoderma Stromaticum (ExtTs) e posterior fracionamento pela técnica de Cromatografia líquida de proteína rápida (CLPR). As frações resultantes da cromatografia foram utilizadas em ensaios de produção de óxido nítrico por macrófagos pela reação colorimétrica de Griess e imunogenicidade dos esporos e ExtTs (Extrato bruto de Trichoderma stromaticum). Os resultados mostraram que a ultraestrutura dos esporos inativos revelou desorganização intracelular e aumento da espessura da parede. O fracionado do extrato bruto gerou uma fração de pools denominados 2 e 4 que inibiram significativamente a produção de NO por macrófagos ativados com IFN- + LPS. Pequenas concentrações de esporos de T. stromaticum mudaram significativamente a ultraestrutura de macrófagos murinos. Tais mudanças sugerem a possibilidade de ocorrência do processo de autofagia. O método de análise Cromatografia líquida de proteína rápida permitiu selecionar uma fração do T. stromaticum com potencial imunossupressor que constitui alvo de grande interesse para uma futura caracterização da molécula, devido à sua possível relevância terapêutica. Até então, nosso estudo sugere que o uso de T. stromaticum , como biopesticida em aparelhos de aerossol, deve ser realizado com cuidado para evitar problemas de saúde para os trabalhadores das plantações.

ASSUNTO(S)

engenharia nuclear teses.

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