Uma abordagem fenotípica e molecular em leveduras do gênero Candida isoladas de cães. / A phenotypic and molecular approach in Candida yeasts isolated from dogs.

AUTOR(ES)
FONTE

IBICT - Instituto Brasileiro de Informação em Ciência e Tecnologia

DATA DE PUBLICAÇÃO

11/12/2008

RESUMO

O gênero Candida é composto por leveduras que vivem como comensais na microbiota de homens e animais. Nos últimos anos, tem sido observado aumento considerável de relatos de enfermidades causadas por estas leveduras acometendo variadas espécies animais. Há relatos do surgimento de cepas resistentes a derivados azólicos, in vitro, mas ainda são poucos os estudos que abordam o perfil de sensibilidade de Candida spp., isoladas de animais, bem como o perfil genotípico destes isolados. Ademais, o gênero Malassezia também merece destaque na Medicina veterinária, especialmente a M. pachydermatis. Com este estudo, buscou-se conhecer a microbiota fúngica, por leveduras, em cães saudáveis, com ênfase nos aspectos fenotípicos e genotípicos de Candida spp. Para tanto, foram analisadas 203 amostras de boca, 110 de mucosa vaginal, 93 do prepúcio e 123 da região perianal de cães. As espécies de levedura isoladas foram identificadas por suas características fenotípicas, de forma manual e por sistema automatizado (VITEK 2), bem como pelo padrão genotípico (polimorfismo de tamanho dos fragmentos amplificados) das regiões ITS1 e ITS2 do DNAr. Foram avaliadas, também, cinco cepas de C. albicans e 3 C. tropicalis, oriundas da micoteca do CEMM. A técnica de microdiluição em caldo (CLSI; M27-A2, 2002), com modificações, foi empregada para avaliar a sensibilidade de Candida spp. e M. pachydermatis em relação ao cetoconazol (CET), itraconazol (ITC), fluconazol (FLC), anfotericina B (ANB) e caspofungina (CAS). De acordo com a identificação manual, três espécies de Candida foram encontradas: C. parapsilosis (n=17), isolada em todos os sítios anatômicos; C. tropicalis (n=3), na região perilabial, perianal e prepúcio; e C. albicans (n=2), presente somente na região perianal. Foram isoladas 207 cepas de M. pachydermatis, das quais 34,8% foram da região perianal, 32,4 % da região perilabial, 22,7% da mucosa vaginal e 10,1% do prepúcio. Saccharomyces cerevisiae (n=1) e Rhodotorula sp. (n=1) também foram encontradas. Os valores de concentração inibitória mínima (CIM) do CET, ITC e FLC, contra as cepas de Candida spp., foram 0,0316 g/mL; 0,06 a >16 g/mL; e 0,564 g/mL, respectivamente. Todos os isolados deste gênero foram sensíveis a CAS e ANB. As 20 cepas de M. pachydermatis apresentaram CIM entre <0,03 0,25 g/mL para CET e ITC, CIM = 8 g/mL para FLC, CIM >64 g/mL para CAS e CIM = 0,25 g/mL para ANB. A amplificação pela reação em cadeia da polimerase seguida de eletroforese em gel de agarose (PCR-AGE) permitiu a identificação de seis espécies diferentes. Percentuais de 96,7 e 86,7 de concordância foram encontrados entre PCR-AGE e VITEK versus método fenotípico manual, respectivamente. Este estudo demonstrou a presença de Candida spp., M. pachydermatis, S. cerevisiae e Rhodotorula sp. como parte da microbiota de cães saudáveis, e que, isolados de C. albicans e alguns de C. tropicalis, oriundos destes animais, apresentam resistência, in vitro, aos derivados azólicos testados. O PCR-AGE mostrou maior percentual de concordância com o método manual, além de ser mais rápido e sensível do que os demais métodos analisados, podendo o seu uso ser indicado para diagnóstico de rotina, de cepas de Candida spp. de origem veterinária.

ASSUNTO(S)

candida leveduras sensibilidade cães pcr reproducao animal yeasts candida susceptibility dogs pcr

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