Seleção e caracterização molecular de uma lipase do metagenoma de solo do cerrado

AUTOR(ES)
DATA DE PUBLICAÇÃO

2010

RESUMO

O solo é um habitat com elevada diversidade de microrganismos e, portanto com potencial de utilização como fonte de enzimas industriais. Este recurso genético pode ser explorado para a identificação de novas biomoléculas que sejam adequadas para aplicações biotecnológicas. Enzimas microbianas são as proteínas mais comercializadas no mercado mundial e o microbioma solo, como outros, é uma importante fonte de genes para aplicações biotecnológicas. No entanto, estimativas indicam que uma pequena fração de microrganismos de solo é passível de cultivo em laboratório. A construção de bibliotecas metagenômicas a partir de DNA total de amostras ambientais surge como uma alternativa para acessar esta informação genética ainda não explorada, e, portanto, é uma importante ferramenta para obtenção de novos genes. As lipases são hidrolases de grande aplicação biotecnológica, podendo ser utilizadas na indústria alimentícia, na produção de detergentes, de biodiesel, na biorremediação de rejeitos industriais de origem lipídica, entre outros processos. Considerando o potencial biotecnológico de aplicação destas enzimas, a necessidade da constante busca de enzimas com propriedades cinéticas adequadas à utilização em processos industriais, bem como o potencial de utilização de bibliotecas metagenômicas como fonte de novos genes, este trabalho visa à seleção e caracterização de novas lipases do metagenoma de solo de Cerrado. Com a triagem funcional da biblioteca metagenômica foram obtidos três clones com atividade lipolítica de 6.720 analisados. O clone LIP3, que apresentava um maior halo de degradação em meio com tributirina, foi caracterizado e sequenciado. Na sequência completa de um dos fragmentos de restrição (4kb), foram identificadas quatro ORFs (quadros de leitura aberta), ORF1-aldolase, ORF2-lipase/esterase, ORF3-acil-CoA desidrogenase e ORF4-uridiltransferase. A comparação desta lipase/esterase com outras sequências de lipases depositadas no banco de dados do NCBI, resultou na sua classificação como pertencente a uma nova família de lipases e permitiu a identificação de motivos de aminoácidos conservados com lipases da família V. A maior identidade de proteínas (63%) foi observada com uma lipase de solo de florestas.

ASSUNTO(S)

cerrados - solos lipases metagenoma enzimas - aplicações industriais lipase metagenomic industrial enzymes ciencias biologicas

Documentos Relacionados