Resposta imune humoral em camundongos à sub-fração obtida por digestão enzimática (tripsina) do antígeno de alta massa molecular de Paracoccidioides brasiliensis

AUTOR(ES)

Juliana Rubira Gerez

DATA DE PUBLICAÇÃO

2007

RESUMO

Paracoccidioidomicose (PCM) é uma micose sistêmica causada pelo fungo dimórfico Paracoccidioides brasiliensis que libera diversos componentes imunogênicos, dentre eles o de alta massa molecular (hMM). O objetivo desse trabalho foi obter a sub-fração do componente de alta massa molecular por digestão com tripsina, assim como avaliar a resposta imune humoral a este componente na paracoccidioidomicose experimental. Inicialmente a fração hMM (~380KDa) foi obtida por cromatografia em Coluna de Sephadex G - 200 e a seguir tratada com tripsina por 60 , 120 , 150 a 37ºC e re-analisada por Cromatografia em Coluna de Sephadex G 100. A sub - fração F17 -II selecionada foi analisada por SDS - PAGE e utilizada na imunização de camundongos BALB/c. A seguir foi analisado o nível de IgG anti-gp43 , anti-hMM e gp43 solúvel nos grupos experimentais de camundongos normal, imunizado, imunizado/infectado e infectado utilizando ELISA indireto e ELISA de captura. Os resultados obtidos demonstraram nível significativo de IgG anti - sub-fração F17 -II 28 e 56 dias pós imunização. No entanto não houve diferença significativa no nível de IgG anti-sub-fração F17 -II entre o grupo imunizado/infectado e infectado. Foi observado nível elevado de IgG anti - gp43 ou anti - hMM nos animais infectados em relação ao controle mas não entre infectados e imunizados/infectados. Concluímos pelo trabalho que a fração hMM de P. brasiliensis apresenta suscetibilidade à ação da enzima tripsina, podendo gerar dois fragmentos de massa molecular distintas em função do tempo de incubação. A F17-II resultante da digestão com tripsina apresenta massa molecular similar a gp43 e não é capaz de potencializar a resposta imune humoral na PCM experimental em camundongos por processo de imunização.

ASSUNTO(S)

paracoccidioidomicose resposta imune tripsina immune response trypsin paracoccidioides brasiliensis

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