Purificação e caracterização de uma bacteriocina produzida por Bacillus sp. P45 / Production and characterization of a bacteriocin produced by Bacillus sp. P45
AUTOR(ES)
Sirtori, Lisana Reginini
DATA DE PUBLICAÇÃO
2007
RESUMO
Uma bacteriocina produzida por um microrganismo isolado do intestino do peixe Jaraqui, da bacia Amazônica, foi caracterizada. A bactéria foi identificada como pertencente ao gênero Bacillus por testes citomorfológicos, bioquímicos e fisiológicos. A análise filogenética feita através da seqüência do rDNA 16S revelou que a bactéria é geneticamente próxima de bactérias como B. subtilis e B. amyloliquefaciens. A bacteriocina foi produzida no início da fase exponencial de crescimento e a sua concentração atingiu o nível máximo no início da fase estacionária, caracterizando-se como metabólito primário. O sobrenadante inibiu Staphylococcus aureus, Salmonella Gallinarium, Listeria monocytogenes, Erwinia caratorvora entre outras espécies patogênicas. A atividade manteve-se constante em temperaturas de 10 a 100 ºC, por 30 minutos, iniciando um declínio a 100 ºC por 40 minutos. No teste do efeito de enzimas proteolíticas, a pronase E causou a perda do efeito antimicrobiano, indicando que se trata de uma substância de natureza protéica. A purificação foi realizada inicialmente por precipitação com sulfato de amônio, seguida de uma cromatografia de gel filtração (Sephadex G- 100). A etapa final foi a cromatografia de troca iônica (DEAE Sepharose). No final deste processo, obteve-se um fator de purificação de 42,6 com uma recuperação de 6,75%. A bacteriocina purificada manteve sua estabilidade térmica, mas perdeu a estabilidade frente a enzimas proteolíticas. O espectro de infravermelho indicou grupamentos NH e ligações peptídicas e o espectro de massas indicou um peptídeo de 1518,554 Da. A bacteriocina parcialmente purificada tem um EC50 de 400UA/mL e provocou uma diminuição de 6 logs de células de Listeria monocytogenes com 800UA/mL, provavelmente provocando lise celular.
ASSUNTO(S)
bacteria bacteriocina antimicrobiano
ACESSO AO ARTIGO
http://hdl.handle.net/10183/8625Documentos Relacionados
- Potencial queranolítico e caracterização de uma queratinase extracelular de Bacillus sp. P45
- Produção, purificação e caracterização de um peptídeo antimicrobiano produzido por uma linhagem de Bacillus sp. P34
- Purificação e caracterização da bacteriocina cereína 8A, produzida por uma linhagem de Bacillus cereus
- Caracterização da bacteriocina cereína 8A produzida pelo Bacillus cereus 8A
- Caracterização e aplicação de proteases produzidas por linhagens de Bacillus sp.