PurificaÃÃo e caracterizaÃÃo parcial de uma enzima trombina-sÃmile da peÃonha da serpente Bothrops leucurus (viperidae)
AUTOR(ES)
Ilca Priscila de AraÃjo
DATA DE PUBLICAÇÃO
2006
RESUMO
A serpente Bothrops leucurus (jararaca do rabo branco), maior responsÃvel pelos acidentes botrÃpicos no Estado da Bahia, tambÃm tem ocorrÃncia registrada em Pernambuco. As alteraÃÃes na coagulaÃÃo sangÃÃnea sÃo uma caracterÃstica relevante no envenenamento provocado pela peÃonha de B. leucurus. Enzimas ofÃdicas que atuam estrategicamente na hemostasia com aÃÃo direta sobre o fibrinogÃnio, convertendo-o em fibrina, sÃo chamadas trombina-sÃmile. Apesar de estarem presentes em diversas peÃonhas botrÃpicas e representarem modelos moleculares para o desenvolvimento de novas drogas e reagentes, poucos estudos tÃm sido realizados com estas toxinas, inclusive com a peÃonha de B. leucurus. Neste trabalho foi realizada a purificaÃÃo e caracterizaÃÃo parcial de uma toxina trombina-sÃmile da peÃonha de B. leucurus. A enzima trombina sÃmile foi obtida a partir do fracionamento de 600 mg da peÃonha total de B. leucurus em quatro etapas de purificaÃÃo: troca iÃnica em Mono-Q, afinidade em Benzamidina-Sepharose, gel filtraÃÃo em TSK-G3000 SW e fase reversa em C4. A toxina purificada, denominada BL-TL I, teve um rendimento final de 0,05% e apresentou cadeia Ãnica de massa molecular 23 e 31,8 KDa, conforme estimativa em SDS-PAGE em condiÃÃes nÃo redutoras e redutoras, respectivamente. BL-TL I teve sua atividade parcialmente reduzida apÃs cromatografia em coluna C4, nÃo apresentando atividade sobre os substratos S-2238 e S-2765, bem como ativadora de fator X. Por outro lado, mesmo com reduzida atividade coagulante sobre fibrinogÃnio, a BL-TL1 foi capaz de hidrolisar o substrato S-2222. A BL-TL1 Ã a primeira enzima trombina-sÃmile purificada da peÃonha de B. leucurus, porÃm outra tÃcnica complementar deve ser estabelecida para obtenÃÃo da toxina com atividade total para estudos subseqÃentes, com o intuito de complementar a caracterizaÃÃo da referida toxina
ASSUNTO(S)
bothrops leucurus purificaÃÃo anatomia animal enzima trmbina-sÃmile
Documentos Relacionados
- PurificaÃÃo e caracterizaÃÃo parcial de duas toxinas hemorrÃgicas da peÃonha de Jararaca malha-de-cascavel, Bothrops eryhromelas (Serpentes, Viperidae)
- PurificaÃÃo e CaracterizaÃÃo Parcial de duas Hemorraginas Ativadoras de Fator X da PeÃonha de Bothrops leucurus (jararaca do rabo branco) (Wagler, 1824)
- PurificaÃÃo e caracterizaÃÃo de uma nova fosfolipase A2 Ãcida da peÃonha de Bothrops pauloensis
- CaracterizaÃÃo bioquÃmica e funcional de uma nova L-aminoÃcido oxidase isolada da peÃonha da serpente Bothrops pirajai
- Uma lectina do lÃquen Cladonia verticillaris: purificaÃÃo e caracterizaÃÃo parcial
