PurificaÃÃo, caracterizaÃÃo, propriedades biolÃgicas da Lectina de Rizoma de Microgramma vaccinifolia e estudo molecular de Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici

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DATA DE PUBLICAÇÃO

2009

RESUMO

Lectinas sÃo proteÃnas que se ligam a carboidratos e glicoconjugados. Rizomas de Microgramma vaccinifolia tÃm ampla utilizaÃÃo na medicina popular no tratamento de hemoptises e hematÃria. Os objetivos deste trabalho foram isolar, caracterizar, avaliar as atividades tÃxica, antibacteriana e antifÃngica da lectina de rizoma de M. vaccinifolia (MvRL) e identificar as raÃas 1, 2 e 3 de Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici por biologia molecular. As proteÃnas do extrato de rizoma (ER) foram fracionadas com sulfato de amÃnio fornecendo a fraÃÃo 0-60% (F0-60%). Atividade hemaglutinante (AH) e concentraÃÃo de proteÃna foram determinadas em ER e F0-60%. MvRL foi isolada por cromatografia da F0-60% em Sephadex G-25. A AH de MvRL foi avaliada em presenÃa de carboidratos, glicoproteÃnas, preparaÃÃes contendo carboidrato das raÃas 1, 2 e 3 de Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici, em diferentes temperaturas, valores de pH e na presenÃa de Ãons. Eletroforese em gel de poliacrilamida de MvRL foi realizada em condiÃÃes nativas (PAGE) e desnaturadas (SDS-PAGE). O efeito de MvRL sobre Artemia salina, bactÃrias e fungos foi tambÃm avaliado. O DNA das raÃas 1, 2 e 3 de Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici foi isolado utilizando marcadores moleculares ISSR e RAPD. MvRL aglutinou eritrÃcitos humanos e sua AH foi inibida por manose, soro fetal bovino e preparaÃÃes de F. oxysporum f.sp. lycopersici. A AH de MvRL foi termoestÃvel, ativa em pH 5,0 e dependente de Ãons. PAGE revelou MvRL como uma proteÃna Ãcida e SDS-PAGE revelou banda polipeptÃdica glicosilada de massa molecular 17 kDa. Cromatografia de gel filtraÃÃo definiu a massa molecular nativa de MvRL como 100 kDa indicando a lectina como um agregado molecular. MvRL foi tÃxica sobre A. salina (CL50 de 154,16 μg/mL), nÃo exibiu atividade antibacteriana e apresentou atividade antifÃngica. MvRL foi mais ativa em inibir o crescimento da raÃa 3 de F. oxysporum f.sp. lycopersici. Os marcadores moleculares foram adequados para avaliar a variabilidade genÃtica das raÃas. Em conclusÃo MvRL Ã uma lectina com atividade antifÃngica e o efeito sobre F. oxysporum f.sp. lycopersici foi diferente para as trÃs raÃas

ASSUNTO(S)

rapd fusarium oxysporum f.sp. lycopersici issr atividade antifÃngica antifungal activity issr lectin rapd fusarium oxysporum f.sp. lycopersici microgramma vaccinifolia bioquimica lectina microgramma vaccinifolia

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