Padronização de metodo utilizando a cromatografia liquida de alta eficiencia para a determinação de nicotina e cotinina em plasma de tabagistas

AUTOR(ES)
DATA DE PUBLICAÇÃO

2003

RESUMO

O tabagismo é considerado um problema de saúde pública, uma vez que é responsável por cerca de 4 milhões de morte anualmente em todo o mundo. Nos últimos anos tem ocorrido um aumento dramático na procura por métodos de quantificação da nicotina e outros derivados do tabaco, na intenção de se avaliar as terapias de cessação do hábito de fumar. Nesse trabalho foram feitas a padronização e a validação de uma metodologia para a quantificação da nicotina e de seu principal metabólito, cotinina, em 1 mL de. plasma de tabagistas com adesivo transdérmico de nicotina, após submetidos a um período de abstinência ao tabaco de 24 horas. O plasma foi extraído com diclorometano e analisado por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) em sistema cromatográfico da Shimadzu, Japão, em coluna LUNA (Phenomenex , USA), 150 mm de comprimento, 4,6 mm de diâmetro interno e 5 f.tm de partícula. Nas condições padronizadas a nicotina, a cotinina e o 2-fenilimidazol (padrão interno) eluíram em 4,6 :t 0,1 min., 6,2 :t 0,1 mino e 15,2 :t 0,1 min., respectivamente. A linearidade do método foi observada com amostras de plasma adicionadas com padrões nas concentrações de 10 a 50 ng/mL para a nicotina e de 10 a 500 ng/mL para a cotinina, mostraram -se adequadas aos propósitos do estudo, com coeficientes de determinação de 0,9928 para a nicotina e 0,9978 para a cotinina. A recuperação média do estudo foi de 75,8% e 77,7% para a nicotina e a cotinina, respectivamente. A precisão intra-ensaio teve coeficiente de variação médio de 6,3% (:tO,01) para a nicotina e 7,0% (:tO,01) para a cotinina, e a precisão interensaio apresentou coeficientes de variação médios de 7,1 (:t 0,02) e 7,6 (:t 0,02) para a nicotina e a cotinina, respectivamente. Os limites de detecção foram 5 e 3 ng/mL e de quantificação 10 e 5 ng/mL para a nicotina e a cotinina. O método mostrou-se adequado aos estudos de exatidão por apresentar variação entre a concentração teórica e a calculada pelo método inferior a 10 %. O estudo de estabilidade comprovou que as amostras podem ser armazenadas em geladeira por um período de até 3 meses sem apresentarem perdas dos princípios ativos maior que 10%. O método forneceu uma separação adequada da cafeína, considerada o principal contaminante da amostra. A técnica padronizada e validada permitiu a análise de amostras de tabagistas com adesivo transdérmico de 21 mg e a possibilidade de realização de estudos futuros correlacionando a farmacocinética e a farmacodinâmica da nicotina com o rítmo circadiano da pressão arterial

ASSUNTO(S)

farmacocinetica validação de metodo

ACESSO AO ARTIGO

Documentos Relacionados