Padronização da imunohistoquímica para detecção de clostridium chauvoei e clostridium septicum e comparação com a imunofluorescência direta

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DATA DE PUBLICAÇÃO

2001

RESUMO

Padronizou-se a técnica da imunohistoquimica empregando o complexo de imunoenzimatico streptavidina-biotina marcada (LSAB) para detectar Clostridium chauvoei e Clostridium septicum e comparou-se a mesma com a técnica de imunofluorescencia direta (IFD), usando diferentes tecidos de cobaios inoculados experimentalmente com Clostridium chauvoesi, Clostridium septicum, Clostridium sordellii, Clostridium novyi tipo A e Clostridium chauvoei e anti-Clostridium septcum foram produzidos em coelhos e purificados em colina de DEAE-celulose. Partes das imonoglobunas foram conjugadas com isotiocianato de fluoresceína e o restante foi utilizada na técnica de LSAB. Os conjugados anto-Clostridium chauvoei e anti-Clostridium septicum apresentaram títulos de 256 e 512, respectivamente, enquanto o anticorpo primário anti-Clostridium chuvoei e anti-Clostridium septicum foram padronizadas na diluição de 1:2000/15 minutos e 1:4000/40 minutos de incubação, respectivamente. Não foram observadas reações cruzadas entre os anticorpos avaliados e nenhuma das outras espécies de clostridios utilizadas. Clostridium chauvoei e Clostridium septicum foram detectadas em todas as seções e impressões de tecidos pelas técnicas de LSAV e IFD. A técnica de LSAB desenvolvida neste estudo, mostrou-se eficiente para detectar Clostridium chauvoei e clostridium septicum em tecidos de cobaios fixados pelo formol e incluídos em parafina, e apresentou 100% de sensibilidade e especificidade em relação à IFD

ASSUNTO(S)

clostridium teses imunohistoquímica teses imunofluorescência teses

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