Mecanismo rnolecular da resistÃncia de urna colÃnia de Culex quinquefasciatus (Diptera: Culicidae) ao Bacillus sphaericus

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DATA DE PUBLICAÇÃO

2005

RESUMO

A atividade larvicida do Bacillus sphaericus depende da ligaÃÃo da toxina binÃria (Bin) com um receptor especÃfico presente no epitÃlio intestinal de larvas de culicÃdeos. Este trabalho descreve a clonagem e sequenciamento do gene deste receptor em larvas de Culex quinquefasciatus de uma colÃnia susceptÃvel (CqSF) e de uma resistente (CqRL1/2362) ao Bs, para elucidar o mecanismo molecular da resistÃncia. Ensaios de afinidade in vitro mostraram que uma proteÃna de 60 kDa à o receptor da toxina na colÃnia CqSF e nenhuma molÃcula funcional foi observada em preparaÃÃes da colÃnia CqRL1/2362. O sequenciamento do gene obtido da colÃnia CqSF mostrou uma seqÃÃncia de 1925 pb composta por regiÃes 5â e 3ÂnÃo traduzidas, sequÃncia codificadora e Ãntron. A respectiva sequÃncia do gene para a colÃnia CqRL1/2362 mostrou uma deleÃÃo de 19 nucleotÃdeos, geradora de uma mudanÃa na fase de leitura de 28 aminoÃcidos e de um cÃdon de terminaÃÃo da traduÃÃo prematuro. A presenÃa deste cÃdon prematuro pode desestabilizar o respectivo mRNA, e impedir sua traduÃÃo, bem como leva a sÃntese de uma proteÃna truncada sem a Ãncora GPI necessÃria a sua localizaÃÃo na membrana epitelial. Em ambos os casos a ausÃncia do receptor no epitÃlio intestinal seria a causa da resistÃncia. Neste trabalho foi produzida ainda uma proteÃna recombinante do receptor de 45 kDa que mostrou funcionalidade, demonstrando que o sÃtio de ligaÃÃo està localizado na porÃÃo N-terminal da molÃcula. Anticorpos obtidos contra esta proteÃna recombinante demonstraram ser uma Ãtima ferramenta de detecÃÃo do receptor nativo

ASSUNTO(S)

receptor genetica culex quinquefasciatus bacillus sphaericus resistÃncia

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