Kinetic studies of HRP adsorption on ds-DNA immobilized on gold electrode surface by EIS and SPR

AUTOR(ES)

Ferreira, Danielle C. M, Mendes, Renata K, Kubota, Lauro T

FONTE

Journal of the Brazilian Chemical Society

DATA DE PUBLICAÇÃO

2010

RESUMO

Este trabalho descreve a construção de um filme de multicomponentes via método layer-by-layer (LbL) e a análise cinética da interação da enzima peroxidase de raiz forte (HRP) sobre a camada de ds-DNA de timo de bezerro formada numa superfície de ouro modificada. As técnicas de ressonância de plásmon de superfície (SPR) e a espectroscopia de impedância eletroquímica (EIE) foram usadas para caracterizar a construção do filme sobre a superfície de ouro. A ressonância de plásmon de superfície forneceu informações essenciais para o estudo e caracterização da interação proteína e ácido nucléico. Este método não necessita de marcador e monitora as interações em tempo real. Os estudos cinéticos obtidos por SPR da formação do filme de HRP sobre o ds-DNA apresentaram valores de 24,7 L mol-1 s-1 e 1,2×10-3 s-1 para k a e k d, respectivamente. A energia livre de Gibbs obtida para o sistema foi de - 23,1 kJ mol-1. Os resultados obtidos mostram que a interação das moléculas da enzima sobre o ds-DNA é cinética e termodinamicamente favoráveis e a interação entre as camadas ocorre principalmente pela atração de cargas opostas.

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