In vitro and in vivo survival of mouse morulas and blastocysts following vitrification in 45% glycerol / Sobrevivência in vitro e in vivo de mórulas e blastocistos murinos vitrificados em meio contendo 45% de glicerol

AUTOR(ES)

Bertolini, Marcelo

DATA DE PUBLICAÇÃO

2011

RESUMO

A toxidez do agente crioprotetor é um dos aspectos mais críticos no sucesso da vitrificação de embriões mamíferos, variando conforme a concentração, o tempo e a temperatura de exposição. Além disto, embriões de diferentes espécies ou estádios de desenvolvimento podem tolerar diferentes níveis de exposição a agentes crioprotetores. Este estudo visou avaliar a sobrevivência in vitro e in vivo de embriões Mus musculus após a vitrificação em diferentes concentrações e tempos de exposição ao crioprotetor previamente à vitrificação. No Experimento 1, mórulas compactas, blastocistos e blastocistos expandidos foram expostos a 10% de glicerol por 10 min (grupo 1) ou 25% de glicerol por 10, 5 ou 2,5 min (grupos 2, 3 e 4) previamente à exposição à solução de vitrificação contendo 45% de glicerol por 1 min, a 20°C, antes da imersão em nitrogênio líquido. A descongelação ocorreu em banhomaria a 20°C por 20 seg, e a diluição do crioprotetor foi realizada em 1 M de sacarose por 10 min. Após cultivo in vitro por 1 e 48 h, os embriões foram avaliados morfologicamente. A sobrevivência in vitro de mórulas compactas e blastocistos não foi afetada pelas concentrações e tempos de equilíbrio em glicerol previamente à vitrificação. No entanto, houve uma menor viabilidade embrionária após a vitrificação de blastocistos expandidos. No Experimento 2, mórulas compactas e blastocistos frescos e vitrificados (conforme o grupo 1, do Experimento 1) foram transferidos para receptoras após cultivo in vitro de 1 h. As taxas de prenhez, baseadas na proporção de fetos viáveis, foram semelhantes entre mórulas compactas vitrificadas e frescas (27 vs. 33%, respectivamente). Entretanto, os blastocistos vitrificados mostraram uma sobrevivência in vivo menor que os controles (9% vs. 52%, respectivamente).

ASSUNTO(S)

vitrificacao vitrification cryopreservation criopreservação embrionária embryo camundongos mouse

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