Imobilização de células permeabilizadas de Debaryomyces hansenii UFV-1 em alginato de cálcio e sua aplicação na hidrólise de galactoligossacarídeos / Immobilization of Debaryomyces hansenii UFV-1 cells in calcium alginate and its application in galactoligoosaccharides hydrolysis

AUTOR(ES)

Waldeck Campanha de Souza Junior

DATA DE PUBLICAÇÃO

2006

RESUMO

O objetivo deste trabalho foi imobilizar, em alginato de cálcio, células permeabilizadas da levedura Debaryomyces hansenii UFV-1 contendo uma [alfa]galactosidase, caracterizar a enzima presente nas células livres e imobilizadas e avaliar o potencial uso das células imobilizadas na hidrólise dos oligossacarídeos de rafinose (RO) presentes no extrato hidrossolúvel de soja. A levedura D. hansenii UFV-1 foi cultivada em meio mineral com extrato de levedura (MME), contendo galactose como fonte de carbono, por 36 h, a 30oC. Após este período, o meio foi centrifugado, o sobrenadante descartado e as células de D. hansenii UFV-1 contendo a enzima [alfa]galactosidase foram permeabilizadas com etanol 50% e posteriormente imobilizadas em alginato de cálcio. As células permeabilizadas apresentaram diminuição de 20,5 vezes na atividade de [alfa]galactosidase após a imobilização em alginato de cálcio. As maiores atividades de [alfa]galactosidase para as células permeabilizadas foram detectadas em pH 4,5, a 60oC, enquanto que para a enzima contida nas células permeabilizadas e imobilizadas as maiores atividades foram determinadas em pH 4,0 e a 70oC. A enzima contida nas células permeabilizadas manteve 82% da atividade original após pré-incubação a 60oC, por 5 h. A pré-incubação a 60 e 70 oC proporcionaram aumento no valor de atividade da [alfa]galactosidase contida nas células imobilizadas, a qual exibiu 157% da atividade original quando pré-incubada por 72 h, a 70oC. O valor da KM app da [alfa]galactosidase contida nas células permeabilizadas, para o substrato ρNP[alfa]Gal, foi de 0,32 mM, enquanto que, para a enzima contida nas células imobilizadas o KM app foi de 0,82 mM. A enzima contida nas células permeabilizadas demonstrou capacidade de hidrólise de rafinose, reduzindo 96,34% da concentração desse açúcar após incubação por 20 h, a 50oC. A [alfa]galactosidase contida nas células permeabilizadas e imobilizadas reduziu apenas 75,54% do açúcar rafinose, nas mesmas condições. Apesar da menor taxa de hidrólise do açúcar rafinose, em solução, pelas células imobilizadas, estas foram reutilizadas por mais 2 vezes nesse processo, somando 3 utilizações sem perda expressiva da atividade de [alfa]galactosidase. A utilização das células imobilizadas, contendo a [alfa]galactosidase, no tratamento dos RO em leite de soja, proporcionou redução de 100% dos teores de rafinose e estaquiose após incubação a 60oC, por 6 h. Esses resultados mostraram que as células imobilizadas de D. hansenii apresentaram potencial para a utilização industrial, no processamento dos RO presentes em produtos derivados de soja.

ASSUNTO(S)

[alfa]galactosidase debaryomyces hansenii immobilization galactoligossacarídeos permeabilização imobilização [alfa] galactosidade debaryomyces hansenii permeabilization biologia molecular galactoligoosaccharides

Documentos Relacionados

• Produção, purificação e caracterização de β-glicosidases livre e imobilizada de Debaryomyces hansenii UFV-1
• Lipids of Debaryomyces hansenii
• Estudo da imobilização de células de Saccharomyces cerevisiae em gel de alginato de cálcio no processo de fermentação alcoólica
• Influence of alginate and chitosan on the precipitation of calcium phosphates
• Imobilização da β-galactosidase de Kluyveromyces lactis em esferas de alginato de cálcio e gelatina para hidrólise da lactose presente no soro de queijo