Expressão procariota de uma forma truncada da glicoproteína E (gE) do herpesvírus bovino tipo 1 e uso em ELISA para anticorpos contra a gE
AUTOR(ES)
Oliveira, Stephan A.M., Brum, Mário Celso S., Anziliero, Deniz, Dellagostin, Odir, Weiblen, Rudi, Flores, Eduardo F.
FONTE
Pesq. Vet. Bras.
DATA DE PUBLICAÇÃO
2013-01
RESUMO
Este trabalho relata a expressão de uma forma truncada da glicoproteína E (gE) do herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1) para uso em imunodiagnóstico. Um fragmento de 651 pares de bases (pb) correspondente ao terço amino-terminal (217 aminoácidos) da gE do BoHV-1 - que compartilha uma alta identidade com a gE do BoHV-5 - foi clonada como proteína de fusão com cauda 6x de histidina em um vetor de expressão em Escherichia coli. Uma proteína solúvel de aproximadamente 25 kDa purificada de lisados de E.coli foi reconhecida em Western blot (WB) por anticorpos monoclonais anti-6xHis-tag e anti-gE. Além disso, a proteína recombinante purificada foi reconhecida em WB por anticorpos presentes no soro de animais soropositivos ao BoHV-1 e BoHV-5. Um ELISA indireto utilizando a proteína recombinante como antígeno apresentou performance comparável a um ELISA gE comercial e foi capaz e diferenciar sorologicamente animais vacinados com uma cepa gE-negativa de BoHV-5 de animais infectados com o BoHV-1. Portanto, a gE truncada pode ser útil em testes sorológicos diferenciais para uso conjunto com vacinas com marcador antigênico gE para o BoHV-1 e BoHV-5.
ASSUNTO(S)
bohv-5 herpesvírus bovino vacina diferencial proteína recombinante
Documentos Relacionados
- Clonagem e expressão em Pichia pastoris da forma truncada da glicoproteína D (gD) de Herpesvírus Bovino tipo 5
- Produção e caracterização de anticorpos monoclonais contra uma cepa do herpesvírus bovino tipo 1 defectiva na glicoproteína C (gC)
- Clonagem e expressão da glicoproteina E (gE) do vírus da doença de Aujeszky em sistema de baculovirus
- Infecção experimental de bezerros com recombinantes do herpesvírus bovino tipo 5 defectivos na glicoproteína E (gE), timidina quinase (TK) e ambos, gE/TK
- Anticorpos locais e sistêmicos induzidos por uma vacina experimental inativada contra o herpesvírus bovino tipo 1