Criopreservação de espermatozoides humanos selecionados pela tecnica de "swin-up" : efeitos sobre a vitalidade, motilidade e integridade acrossomica apos o descongelamento

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DATA DE PUBLICAÇÃO

1998

RESUMO

Apesar do aperfeiçoamento das técnicas de criopreservação, o potencial fértil do sêmen humano criopreservado ainda é insatisfatório. Por outro lado, o processamento do sêmen constitui etapa fundamental nas técnicas de reprodução assistida. A técnica de "swim-up" é o método mais freqüentemente utilizado para o processamento do sêmen humano, pois permite a seleção de um grande número de espermatozóides móveis. O objetivo do presente estudo foi avaliar se a seleção de espermatozóides humanos pela técnica de "swim-up", antes da criopreservação, é capaz de minimizar a perda de motilidade, vitalidade e integridade acrossômica, decorrentes do processo de congelamento-descongelamento. Visa-se, dessa forma, propiciar, após o descongelamento, a recuperação de espermatozóides com potencial fértil superior àqueles não-selecionados. Amostras de sêmen de 15 indivíduos com fertilidade comprovada foram obtidas por masturbação, após 2 a 3 dias de abstinência sexual, e divididas em duas alíquotas de volumes iguais. A primeira delas não recebeu qualquer tratamento (não¬selecionada), enquanto que a segunda foi processada pela técnica de "swim-up" (selecionada). Ambas as alíquotas foram, então, criopreservadas através da técnica de vapor de nitrogênio líquido. A motilidade percentual, e os parâmetros da motilidade espermática foram avaliados por um analisador computadorizado. A integridade acrossômica foi analisada pela técnica de fluorescência, empregando-se a lecitina do amendoim (FITC-PNA), em associação com o corte supravital bis-benzimida (Hoescht¬33258), para avaliação da vitalidade espermática. Cada alíquota foi avaliada quanto à motilidade percentual, parâmetros da motilidade espermática, vitalidade e integridade acrossômica, antes e depois da criopreservação. O teste "t" de Student para amostras pareadas, com nível de significância de 0,05, foi utilizado para determinar diferenças estatísticas na motilidade espermática, vitalidade e integridade acrossômica, bem como para avaliar as diferenças pecentuais destes parâmetros de antes para depois da criopreservação. Os espermatozóides selecionados pela técnica de "swim-up" apresentaram, antes da criopreservação, valores médios de vitalidade, motilidade percentual e parâmetros da motilidade espermática, com exceção da linearidade, significativamente superiores aos dos espermatozóides não-selecionados. Entretanto, não houve diferença estatística no percentual de espermatozóides com acrossomos intactos entre as amostras não-selecionadas e selecionadas. Após a criopreservação, observou-se, em ambas as amostras, queda significativa da motilidade percentual, parâmetros da motilidade espermática, vitalidade e integridade acrossômica. Contudo, não houve diferença estatística na variação percentual da motilidade e vitalidade espermática, de antes para depois da criopreservação, entre as amostras não-selecionadas e selecionadas pela técnica de "swim-up". Em contrapartida, a integridade acrossômica dos espermatozóides criopreservados foi significativamente superior nas amostras selecionadas por esta técnica. Além disso, a queda percentual da integridade acrossômica, depois da criopreservação, foi significativamente menor nas amostras selecionadas pela técnica de "swim-up". Embora a técnica de "swim-up" tenha selecionado a subpopulação de espermatozóides qualitativamente superior, antes da criopreservação, tal tratamento não foi eficaz para minimizar a perda de motilidade e vitalidade, decorrentes do processo de criopreservação. Entretanto, o processamento do sêmen pela técnica de "swim-up", anteriormente à criopreservação, permitiu a recuperação de um percentual maior de espermatozóides com acrossomos intactos, reduzindo a perda de integridade acrossômica, causada pelo processo de criopreservação. Portanto, a seleção de espermatozóides pela técnica de "swim-up", previamente à criopreservação, é benéfica para aumentar o potencial fértil dos espermatozóides criopreservados

ASSUNTO(S)

reprodução humana fecundidade humana semen criobiologia

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