Construção de um espectrofotometro multicanal e de um analisador automatico de fluxo monossegmentado

AUTOR(ES)
DATA DE PUBLICAÇÃO

1996

RESUMO

Um espectrofotômetro multicanal sensível na região visivel do espectro foi construido empregando-se um arranjo de fotodiodos RL512G (EGG- Reti - con) como detector. A parte óptica do espectrofotômetro foi montada segundo o arranjo simétrico de Czerny-Turner, usando-se uma fenda de entrada ajustável espelhos côncavos com 100 mm de distância focal e uma rede de difração com 600 Iinhas mm. Este arranjo óptico resultou em uma dispersão linear de 15.36 nm mm (0,384 nm diodo), possibilitando o monitoramento de uma faixa espectral de cerca de 200 nm, com uma resolução de 1 nm. O controle do instrumento foi efetuado através de um sistema mínimo de computador baseado na CPU 8085. o qual armazena os dados espectrais em sua memória RAM e os transfere para um microcomputador padrão IBM, através de uma porta de comunicaçao serial RS232C. O programa de controle, aquisição e tratamento de dados foi escrito em Microsoft QuickBasic 4.5. A faixa dinâmica e a relação sinal/ruído do espectrofotômetro foram otimizadas empregando-se tempos de integração variáveis e filtros digitais. Os espectros podem ser obtidos em um mínimo de 44 ms (integração constante) ou de 307 ms (integraçao variá - vel), com as absorbâncias das linhas base apresentando desvios padrão respectivamente iguais a 0.0021 e 0.0011, quando são usados filtros digitais sem peso, com média móvel de 5 diodos. Além das aplicações usuais, o espectrofotômetro pode ser empregado em sistemas de análise em fluxo, determinações cinéticas e determinações simultâneas. Um analisador automático de fluxo monossegmentado também foi construido, empregando-se o espectrofotômetro multicanal como detector. Basicamente, o analisador foi implementado com o desenvolvimento de uma válvula amostradora e de um módulo de adição de reagentes automáticos e de um sistema de detecção, controlados por uma interface conectada a um microcomputador através de uma porta de comunicação paralela CI8255. Neste analisador, as bolhas de ar do monossegmento possibilitam a localização da amostra para a adição automática de reagentes e para detecção. Com o desenvolvimento do módulo de adição de reagentes, determinações que envolvem reações sequenciais podem ser empregadas em análise em fluxo monossegmentado, com uma sensibilidade que independe do volume de amostra injetado e com um consumo de reagentes frequentemente menor que o de outros sistemas de análise em fluxo. O programa de controle do instrumento foi escrito em Microsoft QuickBasic 4.5. O analisador foi aplicado às determinações de espécies de interesse clínico, tais como glicose, creatinina e uréia. Um procedimento de diluição foi desenvolvido, possibilitando que o soro e/ou plasma seja diluído simultaneamente com a injeção. Com o uso de reatores de vidro e uma frequência de amostragem de 90 h, um grau de intercontaminação de 2,5 % foi obtido nas determinações das três substâncias. Os resultados foram comparados com os do Hospital de Clínicas da UNICAMP, sendo obtidos coeficientes de correlação iguais a 0,997; 0,982 e 0,996 para as determinações de glicose, creatinina e uréia, respectivamente.

ASSUNTO(S)

instrumentação espectrofotometria multicanal analise em fluxo

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