COMPARAÇÃO DE MÉTODOS PARA EXTRAÇÃO DE RNA DE FOLHAS DE Passiflora edulis SIMS
AUTOR(ES)
LUZ, ANNY CAROLYNE DA, PRETTI, IRANY RODRIGUES, BATITUCCI, MARIA DO CARMO PIMENTEL
FONTE
Rev. Bras. Frutic.
DATA DE PUBLICAÇÃO
2016-02
RESUMO
RESUMO Para análises de genômica funcional, é indispensável que o RNA esteja íntegro. Folhas de Passiflora edulis são ricas em metabólitos secundários que dificultam o processo de extração de RNA, principalmente por desencadearem processos oxidativos e precipitarem juntamente os ácidos nucleicos. Este estudo objetivou analisar três métodos de extração de RNA: Concert™ Plant RNA Reagent (Invitrogen), TRIzol® Reagent (Invitrogen) e TRIzol® Reagent (Invitrogen)/gelo- produtos comerciais específicos para extração de RNA, e indicar qual é o mais eficaz para uso em folhas de maracujazeiro. O RNA extraído com o método TRIzol® Reagent (Invitrogen) não apresentou razões A260/A280 e A260/A230 satisfatórias, tampouco concentrações ideais, ao contrário dos outros 2 métodos. A eletroforese em gel de agarose mostrou, pelo método Concert, banda nítida de DNA em todos os extratos obtidos, o que não ocorreu com os métodos TRIzol e TRIzol/gelo. Com o método TRIzol, as amostras apresentaram arraste durante a eletroforese. Devido à menor contaminação com DNA, às razões A260/A280 e A260/A230 ideais e maior integridade das amostras, o RNA proveniente do método TRIzol/gelo foi utilizado para a RT-PCR. Os amplicons obtidos apresentaram alta similaridade. Considerou-se o TRIzol/gelo como método preferencial para extração de RNA em folhas de P. edulis.
ASSUNTO(S)
passiflora edulis extração de rna concert™ trizol® baixa temperatura
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