Cloning, expression, and analysis of the group 2 allergen from Dermatophagoides farinae from China

AUTOR(ES)

Yu-bao, Cui, Zhou, Ying, Weihong, Shi, Guifang, Ma, Yang, Li, Yungang, Wang

FONTE

Anais da Academia Brasileira de Ciências

DATA DE PUBLICAÇÃO

2010-12

RESUMO

Com a finalidade de obter o produto recombinante do alergeno grupo 2 do Dermatophagoides farinae (Der f2), o gene Der f2 foi sintetizado por RT-PCR. O cDNA continha 441 nucleotídeos e era idêntico em 99,3% à sequência de referência (GenBank AB195580). O cDNA foi ligado ao vetor pET28a para construir o plasmídeo pET28a(+)-Der f2, o qual foi introduzido por transformação em E. coli BL21 e induzido por IPTG. Em SDS-PAGE foi vista mia banda específica de 14 kDa no lisado celular. Conforme estimado por cromatografia, cerca de 3,86 mg do produto recombinante foi obtido, que reagia com IgE sérica de crianças asmáticas. A proteína continha um peptídeo sinal de 17 amino ácidos. Sua estrutura secundária consistia de uma alfa hélice (19,86%), uma fita estendida (30,82%), e uma sequência randômica (49,32%). A localização subcelular desse alergeno foi predita ocorrer nas mitocôndrias. Sua função foi associada com o domínio de reconhecimento lipídico (ML) relacionado a MD-2. Os resultados desse estudo permitem a produção em larga escala do alergeno para o diagnóstico clínico e tratamento das doenças alérgicas.

ASSUNTO(S)

dermatophagoides farinae alergia a ácaro de poeira doméstica alergenos acarianos der f 2 alergeno recombinante imunoterapia bioinformática

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