Células-tronco mesenquimais :caracterização e potencial de diferenciaçãoa cardiomiócitos induzida por doadores de óxido nítrico (SNAP e DEA/NO)

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DATA DE PUBLICAÇÃO

2008

RESUMO

Introdução: A terapia celular para o tratamento de doenças cardíacas é um método terapêutico novo que pode levar a recuperação da função do miocárdio. Porém a fonte de células e o tipo celular com propriedades adequadas de regeneração do tecido cardíaco estão sendo pesquisadas. As células-tronco mesenquimais (CTMs) possuem propriedades que podem permitir uma terapia celular altamente efetiva. Entretanto a literatura apresenta resultados conflitantes em relação aos marcadores e ao seu potencial de diferenciação. Objetivos: Neste trabalho comparamos as CTMs obtidas da medula óssea (CTMs-MO) e do sangue de cordão umbilical (CTMs-SCU) e as células-tronco derivadas do tecido adiposo (CTDAs) e analisamos a expressão dos marcadores cardíacos após exposição com o óxido nítrico (NO). Resultados: As CTMs-MO, CTMs-SCU e as CTDAs apresentaram semelhanças em relação a morfologia, ao tamanho e a complexidade, porém não foram semelhantes imunofenotipicamente em relação aos marcadores CD34 e CD117 e quanto ao potencial de diferenciação. A diferenciação em osteoblastos e condrócitos foi semelhante, porém a diferenciação adipogênica demonstrou que as CTMs-SCU apresentam poucos vacúolos lipídicos, diferentemente das outras fontes. A expressão dos genes FAPB4, osteonectina e colágeno tipo II foi analisada por qPCR para confirmar a diferenciação adipogênica, osteogênica e condrogênica, respectivamente. Os resultados confirmaram que as três fontes apresentam potencial semelhante para a diferenciação osteogênica e condrogênica, mas diferem para a diferenciação em adipócitos. Após a caracterização, as CTMs-MO e as CTDAs foram expostas aos agentes NO, SNAP e DEA/NO. A expressão de marcadores musculares e musculares cardíacos foi analisada por citometria de fluxo, imunofluorescência, RT-PCR e qPCR. Em geral foi observada uma alta variabilidade entre as amostras analisadas. Após a exposição das CTMs-MO e CTDAs ao NO houve um aumento da expressão de alguns marcadores musculares como conexina-43, troponina T e actina cardíaca e do marcador CD34 nas CTMs comparativamente ao grupo de células controle. Contudo não houve diferenças significativas entre as fontes de células nem entre os agentes de NO quando baseados nos resultados da citometria de fluxo e na imunofluorescência. A análise da expressão gênica por RT-PCR e qPCR mostrou que os agentes NO aumentaram a expressão de VEGF e conexina-43. Conclusões: Concluímos que o NO, ou seus metabólitos, aumentam a expressão de marcadores musculares e musculares cardíacos, VEGF e CD34 nas CTMs-MO e CTDAs.

ASSUNTO(S)

cardiovascular system ciencias da saude células-tronco mesenquimais sistema cardiovascular - doenças ciências médicas - dissertações umbilical cord medical sciences cordão umbilical

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