Caracterização de células endoteliais corneanas humanas primárias criopreservadas cultivadas em meio suplementado com soro humano

AUTOR(ES)

Vianna, Lucas Monferrari Monteiro, Li, Hao-Dong, Holiman, Jeffrey D., Stoeger, Christopher, Belfort Jr., Rubens, Jun, Albert S.

FONTE

Arq. Bras. Oftalmol.

DATA DE PUBLICAÇÃO

2016-02

RESUMO

RESUMO Objetivo: Comparar células endoteliais de córnea humana (HCECs) criopreservadas e cultivadas em meio suplementado com soro humano (HS-SM) com HCEC criopreservadas e cultivadas em meio suplementado com soro bovino fetal (FBS-SM). Métodos: Três pares de córneas humanas de doadores com 8, 28 e 31 anos de idade foram obtidos do banco de olhos e, de cada par, uma córnea foi utilizado para iniciar uma cultura com HS-SM e outra com FBS-SM. Ao atingir a confluência, as populações de células foram congeladas utilizando-se dimetil-sulfóxido 10% no respectivo meio de cultura. Após descongeladas, as células cultivadas em HS-SM foram comparados com as cultivadas em FBS-SM por meio de morfologia, curva de crescimento, imuno-histoquímica, reação em cadeia de Reação em cadeia da polimerase da transcrição reversa em tempo real (RT-PCR) para marcadores de células endoteliais e tempo de descolamento. Resultado: Não foram observadas diferenças morfológicas antes ou após a criopreservação. Curva de crescimento mostrou contagens celulares semelhantes em ambos os meios, com discreta tendência para um maior número em FBS-SM. As células cultivadas em ambos os meios mostraram expressão semelhante de marcadores celulares endoteliais quando avaliadas por imuno-histoquímica, embora a expressão genética de marcadores para HCEC tenha sido maior em HS-SM quando avaliado por RT-PCR. Houve uma tendência de maior tempo de descolamento com FBS-SM e passagens iniciais. Conclusões: HS-SM foi semelhante ao FBS-SM na criopreservação de HCEC cultivadas in vitro quando avaliadas por morfologia celular, proliferação celular e expressão proteica, embora a expressão genética de marcadores endoteliais tenha sido maior em células cultivadas em HS-SM quando comparadas a células cultivadas em FBS-SM. O tempo de descolamento foi maior quando utilizado FBS-SM e em passagens iniciais.

ASSUNTO(S)

criopreservação córnea endotélio corneano técnicas de cultura de células meios de cultura

Documentos Relacionados

• Transferência de genes heterólogos para células corneanas epiteliais primárias utilizando vetor lentivírus
• Espessura corneana central e densidade das células endoteliais corneanas centrais após trabeculectomia com e sem mitomicina C
• Otimização da purificação e caracterização adicional de uma desintegrina-RGD recombinante de Bothrops alternatus e seu efeito em células endoteliais humanas (HUVEC).
• Controle genético das células-tronco humanas cultivadas
• Identificação de genes diferencialmente expressos em células endoteliais obtidas pela diferenciação de células-tronco derivadas do tecido adiposo humano