Avaliação da susceptibilidade de gametas e embriões caprinos ao vírus da artrite encefalite caprina. / Evaluation of susceptibility of gametes and embryos in goats caprine arthritis encephalitis virus.

AUTOR(ES)
FONTE

IBICT - Instituto Brasileiro de Informação em Ciência e Tecnologia

DATA DE PUBLICAÇÃO

26/01/2009

RESUMO

Um dos métodos de prevenção da artrite encefalite caprina (CAE) é a separação e sacrifício de animais soropositivos, levando assim a perdas de animais com alto valor genético. Neste contexto, o uso de biotécnicas reprodutivas surge como uma alternativa para o resgate e utilização do material genético desses animais. Por este motivo é que se faz necessário a realização de pesquisas para se avaliar a susceptibilidade dos gametas e embriões e ainda os parâmetros reprodutivos de fêmeas caprinas acometidas com o CAEV. Sendo assim, os objetivos da presente pesquisa foi o de realizar análise molecular e ultra-estrutural de espermatozóides caprinos de animais infectados naturalmente e experimentalmente e ainda em espermatozóides infectados in vitro; caracterizar a ocorrência de degeneração, e ainda presença do vírus da artrite encefalite caprina e susceptibilidade dos folículos ovarianos, espermatozóides e embriões caprinos ao mesmo; e por último avaliar a recuperação de embriões na produção in vivo de embriões de fêmeas caprinas naturalmente infectadas com o CAEV submetidas a um protocolo de superovulação, inseminação artificial e coleta de embriões. Para isto, o experimento foi divido em três etapas, na primeira delas, submeteu-se quatro fêmeas soropositivas para o CAEV e duas fêmeas negativas (grupo controle) a um protocolo de superovulação. Observou-se no grupo de fêmeas positivas para o CAEV um número maior de estruturas recuperadas (oócitos e embriões) do que no grupo controle. Na segunda etapa, foi pesquisada a presença do CAEV em espermatozóides de machos naturalmente e experimentalmente infectados, através das técnicas de reação em cadeia da polimerase (PCR) e microscopia eletrônica de transmissão. Posteriormente, foi testada a susceptibilidade de espermatozóides caprinos ao vírus, realizando-se para isto a técnica de swim up e a infecção in vitro dos mesmos, em três tempos distintos (30, 60 e 120 minutos), em seguida foram submetidos ao teste de PCR e microscopia eletrônica de transmissão. De todas as amostras testadas, apenas uma antes do swim up foi positiva na PCR. Em amostra oriunda de animal que havia sido infectado experimentalmente, foi visualizada uma partícula viral do CAEV na região da peça intermediária no interior de vacúolos. Foi observada a presença de vacúolos também na porção da peça intermediária, porém, sem partícula viral no seu interior em amostra oriunda de animal infectado naturalmente. Na última etapa do experimento, foram analisados espermatozóides e folículos ovarianos através das técnicas de imunohistoquímica e microscopia eletrônica de transmissão, antes e após infecção in vitro com o CAEV e ainda embriões caprinos produzidos in vivo oriundos de cabras negativas e positivas para o CAEV, os quais foram submetidos à análise ultra-estrutural. Na imunohistoquímica das amostras seminais, observou-se imunomarcação positiva em amostras de animais infectados naturalmente, artificialmente e em amostras infectadas in vitro. Nas amostras de tecido ovariano observou-se a imunomarcação na região do estroma. Na análise ultra-estrutural, observou-se espermatozóide com alterações degenerativas e folículos e embriões íntegros. Por todos estes achados observados pode-se concluir que: A infecção pelo CAEV não influencia na recuperação de embriões de fêmeas caprinas infectadas naturalmente; Espermatozóides caprinos podem ser infectados pelo CAEV; E os folículos ovarianos não são susceptíveis ao mesmo.

ASSUNTO(S)

biotécnicas caev espermatozóides folículos embriões reproducao animal biotechnology caev spermatozoa follicles embryos

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