A simple and cost-effective protocol for DNA isolation from buccal epithelial cells
AUTOR(ES)
Aidar, Marisi, Line, Sergio Roberto Peres
FONTE
Brazilian Dental Journal
DATA DE PUBLICAÇÃO
2007
RESUMO
Células bucais são fontes convenientes de DNA para diagnóstico e estudos epidemiológicos. O objetivo deste trabalho foi desenvolver um método simples e prático para obter células epiteliais, através de bochechos, a fim de serem usadas como fonte de DNA e avaliar a estabilidade do DNA na solução de bochecho no decorrer do tempo. Os procedimentos usados neste estudo evitam o uso de solventes orgânicos permitindo uma pratica laboratorial mais segura. Isto é alcançado pela remoção das proteínas celulares por desidratação e precipitação com uma solução saturada de acetato de amônio. Este protocolo permite a extração de maneira rápida, simples, econômica e garante o processamento de várias amostras ao mesmo tempo, agilizando assim os procedimentos laboratoriais. Nossas análises forneceram evidências consistentes de que o DNA extraído por esta metodologia é suficiente para diversas amplificações por PCR (polymerase chain reaction - reação em cadeia pela polimerase). O produto total de DNA variou de 5 a 93 µg (mediana 15 µg; média 20,71 µg). Além disso, o DNA mostrou-se eficientemente preservado na solução de bochecho, a qual pode ser estocada em temperatura ambiente por até trinta dias.
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